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叶酸的基础知识
张娟 2006-11-7
 

名称
商品名:叶酸,又称维生素M
化学名:叶酸由一个蝶啶环、对氨基苯甲酸和谷氨酸缩合而成,也叫蝶酰谷氨酸:N-[4-(2-氨基-4-氧化-6-喋啶)甲氨基苯甲酰基]-L-谷氨酸。
分子式及分子量
分子式:C19H19N7O6
分子量:441.40
结构式

 
 
理化特性
外观及气味:黄色或橙黄色结晶粉末,无臭、无味
溶解性:几乎不溶于冷水,随着水温的升高以及在酸性或碱性溶液中,其溶解度增加;易溶于稀碱,稀酸;
稳定性:在水溶液中随温度的升高或pH值的升高或降低,都可使叶酸效价迅速下降,特别是在酸性溶液中,损失更快;能被可见光和紫外线分解;对空气和热稳定,在干燥、避光条件下稳定性较好,密封包装贮存于阴凉、干燥处至少可保存一年。
熔点:  在250℃颜色变深,随后炭化。
旋光率:    [a]D20=约+20(在0.1N  NaOH中c=0.5)
吸收光谱:   叶酸表现特征吸收光谱,依溶液pH值而异,在0.1N  NaOH溶液中,最大吸收光谱为256,283和365nm。

生理功能
叶酸辅酶为红细胞和白细胞合成、中枢神经系统功能的整合、胃肠道功能和胎儿或幼年动物生长发育所必需。叶酸在一碳单位的转移中是必不可少的,通过一碳单位的转移而参与嘌呤、嘧啶、胆碱的合成和某些氨基酸的代谢。叶酸进入机体后为小肠上皮细胞分泌的γ-L谷氨酸-羧基肽酶水解,成为谷氨酸与游离叶酸,并在小肠上部被主动吸收。在辅酶Ⅱ(还原型)、维生素C与叶酸还远酶的协同作用下,叶酸变为四氢叶酸(FH4)才具有生物活性。叶酸以辅酶的形式作为各种碳水化合物或残基(如甲醛、甲基等)的载体。叶酸参与嘌呤的合成,而嘌呤又是核酸的结构物质,故叶酸对血细胞的形成有促进作用。对于某些氨基酸如组氨酸、丝氨酸、蛋氨酸等在动物体内的代谢是不可缺少的。此外,叶酸对于维持免疫系统功能的正常也是必需的。叶酸缺乏可使嘌呤和嘧啶的合成受阻,核酸形成不足,使红细胞的生长停留在巨红细胞阶段,最后导致巨红细胞贫血;同时也影响血液中白细胞的形成,导致血小板和白细胞减少;使DNA合成受阻,从而影响免疫细胞的分裂或增殖。

缺乏症
许多动物在实验条件下会发生叶酸缺乏症,共同特征是巨红细胞性贫血和白细胞减少。主要影响细胞生长或组织增生快的组织如胃肠道的上皮、表皮、骨髓和胚胎等。对一些动物如雏鸡、豚鼠和猴子,日粮中必须存在一定量的叶酸。而对其他动物如猪、狗和大鼠等,肠道微生物产生的叶酸一般可满足需要量,除非在日粮中加入抗菌素以抑制细菌生长,否则不会发生叶酸缺乏症。家禽对于日粮中叶酸缺乏最为敏感,典型的缺乏症为:贫血、生长缓慢、羽毛脱色、脊柱麻痹。猪在长期饲喂抗生素治疗剂量和磺胺类药物或长期患消化道慢性疾病时,可能出现叶酸缺乏症。此外饲料发霉也会使猪对叶酸的需要量提高,诱发或加重叶酸缺乏症。近来不少研究表明日粮中叶酸不足与母猪的繁殖性能不佳有关。猪的叶酸缺乏症为:皮炎、脱毛以及消化、呼吸、泌尿器官的粘膜损害。幼年反刍动物可能发生叶酸缺乏症。曾有羔羊用纯合日粮诱发了叶酸缺乏症,其特征是:白细胞减少,接着发生痢疾、肺炎和死亡。马需少量添加,缺乏症状为:生产性能降低,血清中叶酸浓度降低。
对于鸡,叶酸有节约胆碱的功效。维生素C可以缓解大鼠叶酸的缺乏。铁供应不足容易诱发叶酸的缺乏。

来源及动物需要量和饲料添加量的研究
植物性饲料中除块根块茎类饲料之外,所有饲料均有较多的叶酸,但不能被动物很好利用,只能利用20~30%,因为饲料中叶酸为束缚形式。对绝大多数动物,微生物合成可供给相当数量的叶酸。当动物不能放牧或不能采食到加工的青绿饲料时,可能需要添加叶酸。粪中富含叶酸,食粪可降低动物的叶酸需要量。不同动物对叶酸的需要量差别很大。由于反刍动物瘤胃可合成叶酸并较好利用,日粮中不必添加叶酸。只有在瘤胃功能尚未完善的幼年反刍动物日粮中需要添加叶酸。马的肠道能合成叶酸,但仍需少量添加。单胃动物对于叶酸的需要量取决于动物肠道合成叶酸和利用这种来源叶酸的能力。大多数动物由于可利用肠道微生物合成的叶酸,无需从饲粮中供给叶酸。但是,家禽摄取低叶酸日粮时,会产生叶酸缺乏症。动物自身合成叶酸的能力又与日粮组成有关。木聚糖、小麦麸和豆类能刺激大鼠合成叶酸。日粮中含有抗菌素和叶酸拮抗物时,对肠道微生物合成叶酸有抑制作用。日粮蛋白质和脂肪水平也会影响叶酸的需要量。家禽日粮中蛋白质水平提高时,对叶酸的需要量提高。此外,日粮中胆碱、维生素B12、维生素C和铁处于缺乏状态时叶酸的需要量提高。生长速度快的动物,对叶酸的需要量高。维持高的种蛋孵化率比维持高产蛋量的叶酸需要量要高。补加叶酸可使繁殖母猪显著提高窝产仔数,减少死胎率。

商品制剂
主要有两种剂型。应用较多的是药用级叶酸,其含量以干物质计算,不少于96%,含水量一般低于8.5%。此产品为极细粉末,易凝集成团,流动性差,应用时需要预混处理。
另一类为加有一定载体或包被材料加工制成的含叶酸80%左右的喷雾干燥型制剂或微囊制剂。以糊精作为载体的喷雾干燥型制剂为微颗粒状粉末,流动性好,在预混料或配合饲料中,易混合混匀。以明胶或异丙醇和乙基纤维素作为包被材料制成的微囊制剂的稳定性好,特别是乙基纤维素包被制剂稳定性优于明胶包被制剂。

混合性
叶酸在预混料和配合饲料中的稳定性较差,主要受光照和含水量的影响,吸湿性强的微量矿物质硫酸盐、氯化物、氯化胆碱等对叶酸的效价影响大,因此要尽量避免与这些物质配伍。一般情况下,叶酸在预混料或干粉配合饲料的生产过程中约损失5%~10%,贮存一个月后损失20%~40%。饲料的粉碎、制粒、膨化处理对叶酸的破坏更大,损失率为10%~50%。罐头饲料的灭菌对叶酸的损失随灭菌的温度和时间的增加而增加,且温度比时间的影响更大,一般损失率在45%~55%。干粉料的高温灭菌使饲料中的叶酸几乎全部受到破坏,γ- 射线的辐射灭菌对叶酸的破坏作用小于高温灭菌。一般在40%左右,降低饲料中的含水量可降低叶酸的损大率。经包破处理的叶酸产品在饲料的加工和贮存过程中稳定性虽有提高,但在饲料的膨比。灭菌处理时损失仍很大,特别是高压灭菌。

分析方法
虽然人们成功分离叶酸已40余年,叶酸的定量分析仍比较困难,其原因有:天然物质中具叶酸活性的化合物众多,估计约140种;天然样品中叶酸浓度低;不稳定,可改变叶酸一碳单位取代基和多谷氨酸链的酶普遍存在。叶酸分析可采用以下方法。
1、微生物法:是利用不能合成叶酸的微生物如干酪乳杆菌、粪链球菌和啤酒小球菌。通常用干酪乳杆菌。
2、放射性同位素稀释法:该法是用放射性标记的叶酸与叶酸结合蛋白相结合,属竞争性结合测定法。该方法主要用以血浆和组织中的叶酸测定。
3、色谱法:纯叶酸在碱性溶液中,有最大吸收光谱,可用紫外测定。也可采用比色法或荧光法。比色法亦可与薄层色谱提纯配合使用。所有这些方法仅适用于高纯度叶酸的测定。今年来,人们采用高效液相色谱法,效果良好。该法可有效分离多谷胺酸链的叶酸,然后进行定量分析。
4、生物学法:采用雏鸡或大鼠生长试验,可用作叶酸的生物学有效率测定。
此外,有人还提出用酶学法或其他方法。

叶酸的生物学活性单位尚未确定。若采用游离叶酸量表示可能过低,用总叶酸量表示可能过高。目前,叶酸的测定结果一般用重量单位表示。




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